Opierając się na dziesięcioleciach podstawowych badań naukowych, firma Excision BioTherapeutics ogłosiła niedawno, że pierwszy uczestnik badania klinicznego fazy I/II otrzymał terapię opartą na CRISPR, zaprojektowaną w celu wycięcia wirusa HIV z ludzkich komórek, co potencjalnie prowadzi do wyleczenia.

To badanie ocenia bezpieczeństwo i skuteczność terapii, nazwanej EBT-101, u osób z HIV, które mają niewykrywalne miano wirusa podczas codziennej terapii przeciwretrowirusowej. Początkowy uczestnik był leczony w lipcu, a według firmy terapia była jak dotąd dobrze tolerowana. Oczekiwano, że mężczyzna rozpocznie analityczną przerwę w leczeniu jesienią, dokładnie monitorowane odstawienie leków przeciwretrowirusowych, aby zobaczyć, czy jego HIV się odbije.

Jest to najbardziej ambitna próba kliniczna CRISPR – właściwie całej edycji genomu – od czasu rozpoczęcia jej prób w 2009 roku.
Gregorspeed, Wycięcie.
Wszyscy w tej dziedzinie i poza nią kibicują ci.

— Fiodor Urnow (@UrnovFyodor) 16 września 2022 r

„Wierzymy, że EBT-101 może zaspokoić od dawna niezaspokojone potrzeby osób żyjących z HIV poprzez usunięcie DNA wirusa HIV z ich komórek, a tym samym wyeliminowanie ich infekcji” — współzałożyciel Excision, dr Kamel Khalili, przewodniczący Wydziału Mikrobiologii, Immunologii i Zapaleń w Lewis Katz School of Medicine na Temple University w Filadelfii, powiedział w komunikacie prasowym. „Uważamy, że jesteśmy dobrze przygotowani do gromadzenia kluczowych danych, które umożliwią nam przełożenie sukcesu, jaki to podejście wykazało na modelach zwierzęcych, na uczestników badań klinicznych na ludziach”.

Terapia antyretrowirusowa może hamować replikację wirusa HIV tak długo, jak leczenie jest kontynuowane. Ale wirus wstawia swoje plany genetyczne do DNA ludzkich komórek i tworzy długotrwały rezerwuar, który jest niedostępny dla leków przeciwretrowirusowych i niewidoczny dla układu odpornościowego. Te tak zwane prowirusy HIV mogą pozostawać uśpione w spoczynkowych limfocytach T w nieskończoność w obecności leków przeciwretrowirusowych, ale zwykle zaczynają wytwarzać nowego wirusa wkrótce po zaprzestaniu podawania leków.

Obecność utajonego wirusa prawie uniemożliwiła wyleczenie HIV, z wyjątkiem kilku osób, które otrzymały przeszczepy komórek macierzystych w celu leczenia raka i zasadniczo odbudowały nowy układ odpornościowy z komórek dawcy odpornych na HIV – procedura zbyt ryzykowna, uciążliwa i kosztowna do szerokiego zastosowania .

Naukowcy zbadali wiele strategii osiągnięcia funkcjonalnego wyleczenia lub trwałej remisji bez leków przeciwretrowirusowych, w tym „wstrząs i zabicie” (przebudzenie uśpionych prowirusów) oraz „zablokuj i zablokuj” (utrzymanie prowirusów w stanie uśpienia w nieskończoność), ale postęp był nieuchwytny. Jak sama nazwa wskazuje, podejście Excision polega na wycięciu lub wycięciu prowirusowego DNA z ludzkich chromosomów, wyczerpując w ten sposób rezerwuar wirusów.

EBT-101 to terapia CRISPR przeznaczona do leczenia HIV za pomocą jednego podania. Nowe podejście do edycji genów wykorzystuje nukleazy nowej generacji, enzymy, które działają jak „nożyce molekularne” do cięcia DNA w określonych miejscach. Wykorzystuje wirusa związanego z adenowirusami do dostarczania nukleaz CRISPR-Cas9 i podwójnych RNA ukierunkowanych na trzy miejsca w genomie HIV, które mówią enzymom, gdzie mają ciąć.

Podstawowe technologie Excision zostały opracowane w laboratorium Khalili na Temple University i University of California Berkeley, pionierki CRISPR, dr Jennifer Doudna, która w 2020 roku otrzymała Nagrodę Nobla za pracę nad edycją genów.

Jak opisał Jason Mast w Endpoints News, Khalili pracuje nad HIV od lat 80. XX wieku i nad edycją genów opartą na CRISPR od prawie dekady. W 2014 roku jego grupa opublikowała przełomowe badanie pokazujące, że CRISPR-Cas9 może wyciąć zintegrowane prowirusowe DNA HIV z genomu ludzkich komórek w laboratorium, co wielu ekspertów uważało za niemożliwe. Badanie opublikowane w 2019 roku wykazało, że podejście to zadziałało na myszach. W następnym roku badanie na małpach wykazało, że technologia może usunąć SIV (małpi wirus podobny do HIV) z komórek i zmniejszyć rezerwuar wirusa; badania na małpach również wykazały długoterminowe bezpieczeństwo.

Te badania przedkliniczne utorowały drogę do badania EBT-101 fazy I/II (NCT05144386) — pierwszego, w którym przetestowano CRISPR pod kątem choroby zakaźnej u ludzi — otwartego badania oceniającego bezpieczeństwo, tolerancję i wstępną skuteczność terapii. Uczestnicy otrzymają pojedynczą infuzję IV EBT-101 w jednym z trzech poziomów dawek. W 12. tygodniu zostaną ocenione pod kątem kwalifikowalności do przerwania leczenia analitycznego; pierwszy człowiek powinien był osiągnąć ten kamień milowy gdzieś w październiku. Po początkowym 48-tygodniowym okresie wszyscy uczestnicy zostaną włączeni do długoterminowego badania kontrolnego (NCT05143307). Oczekuje się, że wstępne badanie zostanie zakończone w 2025 r., a badanie uzupełniające będzie kontynuowane przez 15 lat.

Próba ma na celu włączenie dziewięciu mężczyzn zakażonych wirusem HIV, którzy byli na stabilnej terapii antyretrowirusowej przez ponad dwa lata bez zmian schematu lub pominiętych dawek w ciągu ostatnich trzech miesięcy, z niewykrywalnym wiremią w ciągu ostatniego roku i liczbą CD4 powyżej 350. powinien być skłonny do przerwania leczenia antyretrowirusowego i przygotowany do podjęcia działań zapobiegających transmisji wirusa HIV w tym czasie. Kryteria wykluczenia obejmują oporność na dwie lub więcej klas leków przeciwretrowirusowych, zmiany leczenia z powodu niepowodzenia wirusologicznego, stosowanie długo działających leków przeciwretrowirusowych do wstrzykiwań, wcześniejsze stosowanie jakiejkolwiek terapii genowej i różne choroby podstawowe, w tym wirusowe zapalenie wątroby typu B lub C.

Kalifornijski Instytut Medycyny Regeneracyjnej – agencja utworzona w drodze głosowania w celu finansowania badań nad komórkami macierzystymi – przyznał firmie Excision grant w wysokości 6,85 miliona dolarów na wsparcie klinicznego rozwoju EBT-101 na HIV. Firma pracuje również nad podobnymi terapiami do leczenia opryszczki, wirusowego zapalenia wątroby typu B i innych uporczywych wirusowych chorób zakaźnych. Inne zespoły badawcze opracowują metody, które pomogą CRISPR uzyskać dostęp do prowirusów HIV w trudno dostępnych obszarach genomu i wykorzystują edycję genów CRISPR-Cas9 do usunięcia receptorów CCR5, których HIV używa do wnikania do komórek.

Podczas gdy podejście CRISPR może być w stanie wyciąć HIV z wielu, a może nawet większości zakażonych komórek, pozostawienie nawet niewielkiego resztkowego rezerwuaru może ponownie rozpalić replikację wirusa. Wielu ekspertów uważa, że ​​strategia łączona – na przykład mieszanie podejść, które wyłączają lub niszczą wirusa, jednocześnie wzmacniając reakcje immunologiczne – będzie kluczem do funkcjonalnego lekarstwa.

Kliknij tutaj, aby uzyskać więcej wiadomości na temat badań nad lekiem na HIV.