Nowatorski test może zapewnić, że noworodki z poważną chorobą genetyczną otrzymają niezbędne leczenie
Przebieg pracy przy przygotowaniu próbki do badania czynników redukujących i derywatyzujących maleimid. We wszystkich analizach 3,2 mm DBS materiałów do kontroli jakości, materiałów do badania biegłości i resztkowych próbek klinicznych dziurkowano na 96-dołkowych płytkach. Strzałki (pochodzące z „Eksperymentów z użyciem…”) wskazują, gdzie zmodyfikowano metodę przesiewową pierwszego stopnia w celu zbadania czynników redukujących i czynników derywatyzujących maleimid. DBS ekstrahowano przy użyciu 100 µl WISS zawierającego IS dla aminokwasów, acylokarnityny, nukleotydów, homocystyny (dHcy-2H8) i inne biomarkery, wraz z kwasem mrówkowym i wodzianem hydrazyny. Fałszywy WISS zawierający dHcy-2H8 wraz z kwasem mrówkowym i wodzianem hydrazyny zastosowano również do zbadania obecności zakłóceń z IS. W eksperymentach z użyciem DTT, 12 µl roztworu DTT dodawano do DBS zawierającego WISS, następnie inkubowano przez 45 min w 45°C. W doświadczeniach z użyciem TCEP, DBS i WISS inkubowano przez 45 minut w temperaturze 45°C, następnie do roztworu ekstraktu DBS dodano TCEP i wytrząsano przez 5 minut w temperaturze pokojowej. Ekstrakty próbek następnie przeniesiono, wysuszono pod gazowym azotem i ekstrakty DBS ponownie zawieszono w 40 µl roztworu maleimidu przed wytrząsaniem przez 5 minut w temperaturze pokojowej. Ekstrakty potraktowane maleimidem następnie wysuszono. Ekstrakty estrów niebutylowych ponownie zawieszano w fazie ruchomej, a następnie analizowano metodą FIA-MS/MS) W analizach derywatyzowanych estrem butylu, ekstrakty DBS ponownie zawieszano w zakwaszonym butanolu, a następnie umieszczano w piecu na 20 minut. Ekstrakty butylowanego DBS następnie wysuszono, ponownie zawieszono w fazie ruchomej, a następnie przeanalizowano metodą FIA-MS/MS. Kredyt: Chemia kliniczna (2023). DOI: 10.1093/clinchem/hvad007
Naukowcy opracowali test, który może znacznie poprawić jakość życia niemowląt z homocystynurią (HCU), wrodzoną chorobą, która – jeśli nie zostanie wcześnie leczona – powoduje poważne komplikacje. Badania wykazujące skuteczność tego testu zostały opublikowane dzisiaj w Chemia kliniczna.
HCU utrudnia zdolność niemowlęcia do metabolizowania aminokwasu metioniny, który jest składnikiem wielu białek, takich jak te znajdujące się w mleku matki. Prowadzi to do patologicznego wzrostu poziomu metioniny i innego aminokwasu znanego jako homocysteina, co powoduje poważne komplikacje, jeśli nie jest leczone. Powikłania te obejmują problemy z oczami i szkieletem, nieprawidłowości naczyniowe i niepełnosprawność intelektualną.
Dobrą wiadomością jest to, że wczesne wykrycie i leczenie HCU może zapobiec tym powikłaniom. W związku z tym od 2006 roku Departament Zdrowia i Opieki Społecznej Stanów Zjednoczonych umieścił HCU na liście zaburzeń, w kierunku których noworodki powinny być badane. Jednak obecne testy mierzą tylko poziomy metioniny, które często są nadal niskie, gdy przeprowadzane są badania przesiewowe noworodków. W rezultacie szacuje się, że testy te pomijają około 50% przypadków HCU, które są wówczas obarczone dużym ryzykiem nieleczenia.
Aby temu zaradzić, grupa naukowców kierowana przez dr Konstantinosa Petritisa z Centrum Kontroli i Zapobiegania Chorobom opracowała i zatwierdziła test przesiewowy noworodków w kierunku HCU, który działa poprzez pomiar poziomu homocysteiny. U niemowląt z HCU poziom homocysteiny zwykle wzrasta przed poziomem metioniny i prawie zawsze wzrasta w ciągu pierwszych kilku dni życia, kiedy przeprowadza się badania przesiewowe noworodków, co czyni homocysteinę lepszym wczesnym markerem tej choroby.
Aby ocenić wydajność testu, zespół Petritis wykorzystał go do przesiewania szczątkowych noworodków do badań przesiewowych od niemowląt, które otrzymały już diagnozy. Sto z tych próbek pochodziło od zdrowych pacjentów; 50 pochodziło od niemowląt z ujemnym wynikiem HCU otrzymujących całkowite żywienie pozajelitowe (TPN), które jest podawane wcześniakom na OIOM-ach dla noworodków; a 2 próbki pochodziły od pacjentów HCU-dodatnich.
Test z powodzeniem rozróżnił próbki zdrowe i HCU-dodatnie. Dokładnie sklasyfikował również próbki TPN jako HCU-ujemne, co jest godne uwagi, ponieważ innym problemem związanym z testami metioniny na HCU jest to, że dają one fałszywie pozytywne wyniki u dzieci otrzymujących TPN.
„Tutaj przedstawiamy jedyną metodę przesiewową noworodków z tandemową spektrometrią mas pierwszego poziomu, która bezpośrednio określa ilościowo całkowitą homocysteinę z wysuszonych plam krwi” – powiedział Petritis.
„Zdolność do badania przesiewowego całkowitej homocysteiny podczas badań przesiewowych noworodków pierwszego stopnia jest znaczącym krokiem w kierunku zmniejszenia odsetka wyników fałszywie ujemnych HCU, co umożliwi wczesną identyfikację i interwencję w celu zmniejszenia zachorowalności i śmiertelności związanej z HCU”.
Więcej informacji:
C Austin Pickens i wsp., Multipleksowanie homocysteiny do badań przesiewowych spektrometrii mas pierwszego poziomu noworodków z wykorzystaniem selektywnej derywatyzacji tiolowej, Chemia kliniczna (2023). DOI: 10.1093/clinchem/hvad007
Dostarczone przez Amerykańskie Stowarzyszenie Chemii Klinicznej (AACC)
Cytat: Nowy test może zapewnić, że noworodki z poważną chorobą genetyczną otrzymają niezbędne leczenie (2023, 15 marca) pobrane 15 marca 2023 r. z
Niniejszy dokument podlega prawu autorskiemu. Poza wszelkimi uczciwymi transakcjami do celów prywatnych studiów lub badań, żadna część nie może być powielana bez pisemnej zgody. Ta zawartość jest w jedynie w celach informacyjnych.
